Àwọn Ìwádìí Ìwádìí Endotoxin fún Àwọn Oníṣègùn Aláìlera
Àwọn Ìwádìí Ìwádìí Endotoxin fún Àwọn Oníṣègùn Aláìlera
BETMATIpilẹṣẹ Iṣẹ akanṣe ati Awọn Ipenija Pataki
Àwọn oògùn biopharmaceuticals tọ́ka sí àwọn oògùn tí a ń ṣe nípasẹ̀ ìmọ̀-ẹ̀rọ bí ìmọ̀-ẹ̀rọ ìran àti ìmọ̀-ẹ̀rọ sẹ́ẹ̀lì, títí bí àwọn èròjà ara monoclonal, àwọn èròjà atúntò, àwọn àjẹsára, àwọn ọjà ìtọ́jú sẹ́ẹ̀lì, àwọn ọjà ẹ̀jẹ̀, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ. Àwọn oògùn wọ̀nyí ń ṣiṣẹ́ tààrà lórí ètò ààbò ara ènìyàn tàbí ètò ìṣàn ẹ̀jẹ̀, àti pé ìmọ̀lára wọn sí ìbàjẹ́ endotoxin ga ju ti àwọn oògùn kẹ́míkà lọ. Kódà ìwọ̀n endotoxin tí ó tó 0.1 EU/kg lè fa àwọn ìṣẹ̀lẹ̀ búburú bí ibà, ìkọlù anaphylactic, àti ìkùnà ẹ̀yà ara púpọ̀.
Ní ìfiwéra pẹ̀lú omi oníṣègùn, wíwá endotoxin nínú àwọn oògùn biopharmaceuticals dojúkọ àwọn ìpèníjà pàtàkì mẹ́ta: ① Àkójọpọ̀ àpẹẹrẹ náà jẹ́ dídíjú, ó ní àwọn protein tí ó ní ìfojúsùn gíga (fún àpẹẹrẹ, ìfojúsùn monoclonal antibody tó 100 mg/ml), àwọn surfactants (fún àpẹẹrẹ, polysorbate 80), iyọ̀ buffer (fún àpẹẹrẹ, Tris, phosphate), àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ, èyí tí ó ṣeé ṣe kí ó dí ìhùwàsí Limulus Amebocyte Lysate (LAL) lọ́wọ́; ② Ààlà endotoxin yàtọ̀ gidigidi láàrín àwọn oríṣiríṣi (fún àpẹẹrẹ, àwọn ajẹ́sára sábà máa ń ≤ 10 EU/iwọ̀n, àwọn èròjà monoclonal antibodies ≤ 0.5 EU/mg), tí ó nílò àwọn ọ̀nà ìwádìí gíga-ìfàmọ́ra; ③ Àwọn oògùn biopharmaceuticals kan (fún àpẹẹrẹ, àwọn ọjà ìtọ́jú sẹ́ẹ̀lì) kò dúró ṣinṣin wọn kò sì le fara da ìtọ́jú ṣáájú bí iwọ̀n otútù gíga àti pH líle, èyí tí ó mú kí ìṣòro ìyọkúrò ìdènà pọ̀ sí i.
Ní ìbámu pẹ̀lú àwọn ìlànà pharmacopoeia, ojutu yii pese ojutu fun "ìfọwọ́sowọ́pọ̀ ọ̀nà - ìṣàyẹ̀wò àpẹẹrẹ - ìmúṣẹ ìwádìí - ìṣàkóso dídára" tí a gbé kalẹ̀ lórí àwọn ànímọ́ ti biopharmaceuticals láti rí i dájú pé ó péye, ó báramu, àti pé ó ṣeé gbẹ́kẹ̀lé àwọn àbájáde ìwádìí.
Àwọn opin endotoxin Àwọn oògùn biopharmaceuticals gbọ́dọ̀ wà ní ìbámu pẹ̀lú ọ̀nà ìlò, ìwọ̀n, lílo oògùn náà nílé ìwòsàn, àti àwọn ìlànà ti International Council for Harmonisation of Technical Requirements for Pharmaceuticals for Human Use (ICH) Q6B. Fọ́múlá ìṣirò pàtàkì náà nìyí:
L = K/M
Ibi tí: L jẹ́ ààlà endotoxin (EU/ml tàbí EU/mg); K ni ìwọ̀n endotoxin tó pọ̀jù tí a lè gbà fún kìlógíráàmù ìwọ̀n ara fún wákàtí kan (fún lílo nínú iṣan ẹ̀jẹ̀, K = 5 EU/kg·h; fún lílo intrathecal, K = 0.2 EU/kg·h); M ni ìwọ̀n tó pọ̀jù ti oògùn tí a ń lò fún kìlógíráàmù ìwọ̀n ara fún wákàtí kan (ml/kg·h tàbí mg/kg·h).
Àwọn Ààlà Endotoxin àti Àwọn Ìbéèrè Déédéé fún Àwọn Oníṣègùn Biopharmaceuticals Wọpọ
Ẹ̀ka Oògùn | Àwọn Ọjà Aṣojú | Ibeere fun Idiwọn Endotoxin | Ipa ọ̀nà ìṣàkóso |
Àwọn Ẹgbẹ́ Àrùn Monoclonal | Pembrolizumab | ≤ 0.5-2 EU/mg | Abẹrẹ inu iṣan, Abẹrẹ abẹ awọ ara |
Àwọn Prótéènì Atúnṣe | Insulin ènìyàn tó tún ṣe àtúnṣe, homonu ìdàgbàsókè | ≤ 0.01-0.1 EU/U | Abẹrẹ abẹ awọ ara, Abẹrẹ inu iṣan |
Àwọn abé̩ré̩ àje̩sára | Àjẹsára COVID-19 tí a kò ṣiṣẹ́, Àjẹsára Hepatitis B | ≤ 1-10 EU/iwọn lilo | Abẹrẹ inu iṣan, Abẹrẹ abẹ awọ ara |
Àwọn Ọjà Ẹ̀jẹ̀ | Àkójọpọ̀ nínú ẹ̀jẹ̀ ènìyàn, Immunoglobulin | ≤ 0.5 EU/mililita | Abẹ́rẹ́ inú ẹ̀jẹ̀ |
Àwọn Ọjà Ìtọ́jú Ẹ̀jẹ̀ | Àwọn Ìṣètò Sẹ́ẹ̀lì CAR-T | ≤ 0.06 EU/kg ti iwuwo ara alaisan | Ìfúnpọ̀ inú iṣan |
Àkíyèsí: "Ìwọ̀n" tọ́ka sí ìwọ̀n ìfúnni kan ṣoṣo, àti "U" tọ́ka sí ẹ̀ka ìṣiṣẹ́ ẹ̀dá alààyè. Ó yẹ kí a fìdí ààlà pàtó múlẹ̀ ní ìbámu pẹ̀lú àmì oògùn àti àwọn ìbéèrè ìforúkọsílẹ̀.
Yiyan Awọn Ọna Iwari ati Itupalẹ Ibamu
Àwọn endotoxin wiwa ti awọn oogun biopharmaceuticals si tun dale lori ọna gel-clot ti a fọwọsi nipasẹ awọn oogun, ọna photometric (ọna turbidimetric/ọna chromogenic), ṣugbọn ọna ti o baamu yẹ ki o yan ni ibamu si awọn abuda ayẹwo (fun apẹẹrẹ, ifọkansi amuaradagba, iwọn kikọlu, ibeere ifamọ). Ni awọn ọdun aipẹ, ọna recombinant factor C (rFC) ti ni lilo pupọ sii ninu wiwa awọn oogun biopharmaceuticals nitori agbara idena-idalọwọ ti o lagbara ati iyasọtọ giga rẹ.
Afiwe Ibamu ti Awọn Ọna Pataki Mẹta
Ọ̀nà Ìwádìí | Ilana Pataki | Àwọn àǹfààní | Àwọn ìdíwọ́ | Àwọn Irú Oògùn Oníṣègùn Tó Báramu |
Ọ̀nà Jeli-Clot | Iṣesi laarin LAL ati endotoxin ṣe agbekalẹ jeli kan | ① Iṣẹ́ tó rọrùn; ② Kò sí ohun èlò pàtàkì tó nílò | ① Àìlèṣe láti ṣe ìwọ̀n tó péye, ó wúlò fún ìdánwò ààlà nìkan | Wiwa opin Endotoxin ti awọn ọja ikẹhin ṣaaju itusilẹ |
Ọ̀nà Chromogenic | Ìṣàn omi ti substrate chromogenic n ṣe awọn ọja awọ | ① Ó lágbára láti ṣe ìwọ̀n, ó sì ń mú kí ìwádìí àṣà rọrùn; ② Agbára tó lágbára láti dènà ìdènà | ① Iye owo giga ti awọn ohun elo ati awọn reagents | Ṣíṣàwárí àwọn ọjà bíi monoclonal antibodies àti recombinant proteins (tó nílò ìtọ́jú ṣáájú kí a tó lè mú ìdènà kúrò) |
Ọ̀nà rFC | àtúnṣe Limulus reagent tó ń ṣe àtúnṣe pẹ̀lú endotoxin | ① Ìpele pàtó gíga (ó máa ń ṣe pẹ̀lú endotoxin nìkan, kì í ṣe pẹ̀lú glucan); ② Kò sí ìgbẹ́kẹ̀lé lórí àwọn ohun èlò ẹranko | ① Àwọn oníṣòwò oògùn kan kò tíì mọ̀ | Àwọn àpẹẹrẹ tí ó lè ní glucan, àwọn ọjà ìtọ́jú sẹ́ẹ̀lì (ó yẹ kí a fìdí rẹ̀ múlẹ̀ pé ọ̀nà náà ṣeé ṣe) |
Àṣàyàn Àwọn Ọ̀nà Ìwádìí
Igbesẹ 1: Ṣalaye idi wiwa naa
● Fún "ìdánwò ààlà ìfaramọ́": Fi ọ̀nà gel-clot tàbí ọ̀nà chromogenic sí ipò àkọ́kọ́;
● Fún "ìṣọ́ra ìṣirò nínú ìlànà ìṣẹ̀dá": Fi ọ̀nà chromogenic tàbí ọ̀nà rFC sí ipò àkọ́kọ́;
● Fún "àwọn àyẹ̀wò tí ó ní glucan": Fi ọ̀nà rFC sí ipò àkọ́kọ́.
Igbesẹ 2: Ṣe ayẹwo iwọn ti kikọlu ayẹwo
● Ìdènà díẹ̀ (ìwọ̀n amuaradagba tí ó kéré sí 10 mg/ml, kò sí àwọn surfactants): Ọ̀nà Gel-clot tàbí ọ̀nà chromogenic;
● Ìdènà àárín sí gíga (ìwọ̀n amuaradagba 10-100 mg/ml, tí ó ní polysorbate): Ọ̀nà Chromogenic (tó nílò ìtọ́jú ṣáájú);
● Ìdènà tó ga gidigidi (ìwọ̀n amuaradagba tó ju 100 mg/ml lọ, tó ní àwọn èròjà tó díjú): ọ̀nà rFC.
Igbesẹ 3: Ba ibeere ifamọ mu
● Ààlà ≤ 0.1 EU/ml: Yan ọ̀nà chromogenic (ààlà ìwádìí 0.001 EU/ml) tàbí ọ̀nà rFC;
● Ààlà > 0.1 EU/ml: Ọ̀nà ìdènà jeli le bá ohun tí a béèrè mu.
awọn ẹya ara ẹrọ
-
Àwọn Ọ̀nà Tí A Gbé Ṣáájú Ìtọ́jú àti Àwọn Ìṣẹ̀lẹ̀ Tó Wúlò
Ọ̀nà Ṣáájú Ìtọ́jú
Ìlànà
Awọn Igbesẹ Iṣiṣẹ
Àwọn Irú Àpẹẹrẹ Tó Wúlò
Àwọn ìṣọ́ra
Ọ̀nà Ìyọkúrò
Dín ìṣọ̀kan àwọn ohun èlò ìdènà kù sí ìpele tí kò ní ìdènà
Fi LAL Reagent po àyẹ̀wò náà, omi sí ìwọ̀n amuaradagba tí ó kéré sí 10 mg/ml, kí ó rí i dájú pé ìwọ̀n endotoxin lẹ́yìn ìyọkúrò náà ṣì wà láàrín ìwọ̀n ìtẹ̀síwájú náà.
Àwọn àpẹẹrẹ pẹ̀lú ìwọ̀n amuaradagba àárín sí kékeré (fún àpẹẹrẹ, insulin atúnṣe)
A gbọ́dọ̀ jẹ́rìí ìdíwọ̀n ìfàsẹ́yìn náà (ìwọ̀n ìgbàpadà 50%-200%)
Ọ̀nà Ìṣàn omi Púrọ́tínì
Mu awọn ọlọjẹ pẹlu awọn ohun elo olomi ti o lagbara ti o ni acid/organic
1. Da àyẹ̀wò náà pọ̀ mọ́ 10% trichloroacetic acid ní ìpíndọ́gba 1:1 kí o sì jẹ́ kí ó dúró ní 4°C fún ìṣẹ́jú 30; 2. Sẹ́ńtífùúgù ní 10,000 r/min fún ìṣẹ́jú 10; 3. Mu ohun tí ó wà nínú rẹ̀ fún wíwá nǹkan.
Àwọn èròjà ara tí ó ní ìfojúsùn gíga, àwọn ọjà ẹ̀jẹ̀
Yẹra fun centrifugation ti o pọ ju ti o yorisi ojoriro endotoxin
Ọ̀nà Ìṣàlẹ̀ Ultrafiltering
Àwọ̀ ara Ultrafiltration máa ń pa àwọn èròjà mọ́, nígbàtí endotoxin máa ń kọjá lọ.
1. Fi àpẹẹrẹ náà kún inú páìpù ultrafiltration centrifuge tí kò ní endotoxin 30 kDa; 2. Centrifuge ní 4,000 r/min fún ìṣẹ́jú 15; 3. Gba àlẹ̀mọ́ náà kí a lè rí i.
Àwọn àpẹẹrẹ èròjà amuaradagba macromolecular (fún àpẹẹrẹ, àwọn èròjà ajẹ́mọ́ra monoclonal pẹ̀lú ìwọ̀n molikula > 50 kDa)
Fi omi LAL Reagent fọ awọ ara ultrafiltration náà ní ìgbà mẹ́ta ṣáájú.
Fifikun Awọn Idinamọ Idilọwọ
Àwọn ìdènà máa ń dara pọ̀ mọ́ àwọn ohun tí ó lè dí wọn lọ́wọ́ láti tú endotoxin jáde
Fi ohun tí ó ń dènà ìdènà (fún àpẹẹrẹ, polyethylene glycol 6000) kún ètò ìṣesí náà sí ìwọ̀n ìpele ìkẹyìn ti 0.5%-1%
Àwọn àpẹẹrẹ tí ó ní àwọn surfactants (fún àpẹẹrẹ, àwọn ajẹ́sára tí ó ní Tween 80)
O ṣe pataki lati rii daju pe oludena naa ko ni ipa lori iṣe laarin LAL ati endotoxin
Ọ̀nà Ìwẹ̀nùmọ́ Kírómátógíráàmù
Yọ awọn ọlọjẹ kuro nipasẹ chromatography affinity
Fi endotoxin kun pẹlu ọwọn endotoxin affinity, elute, lẹhinna ṣawari
Àwọn àpẹẹrẹ tí ó ní ìdènà gíga gan-an (fún àpẹẹrẹ, ohun tí ó ń yọ sẹ́ẹ̀lì CAR-T kúrò nínú ara)
Iye owo giga, a lo nikan ni ipele R&D
-
Idanwo Ìdánwò Ìdádúró
A gbọ́dọ̀ ṣe ìwádìí ìdènà kí a tó rí gbogbo oògùn biopharmaceuticals láti rí i dájú pé ìtọ́jú ṣáájú ìtọ́jú náà gbéṣẹ́. Àwọn ìgbésẹ̀ wọ̀nyí ni wọ̀nyí:
1. Múra ẹgbẹ́ àpẹẹrẹ sílẹ̀: Àpẹẹrẹ ìdánwò láìsí ìtọ́jú ṣáájú;
2. Múra àkójọpọ̀ tí a ti gùn sí i: Fi endotoxin tí a mọ̀ sí ìṣọ̀kan (fún àpẹẹrẹ, 0.1 EU/ml) kún àyẹ̀wò náà;
3. Ṣe àwárí ìpele endotoxin ti àwọn ẹgbẹ́ méjèèjì lẹ́sẹẹsẹ, kí o sì ṣírò ìwọ̀n ìgbàpadà: Ìwọ̀n ìgbàpadà = (Ìpele àpapọ̀ ti ẹgbẹ́ tí a fi kún - Ìpele àpapọ̀ ti àwọn àpẹẹrẹ) / Ìpele endotoxin tí a fi kún exogenously × 100%
4. Ìlànà ìdájọ́: Tí ìwọ̀n ìpadàbọ̀sípò bá wà láàárín 50%-200%, kò fi hàn pé kò sí ìdènà kankan; bí bẹ́ẹ̀ kọ́, a gbọ́dọ̀ ṣe àtúnṣe sí ọ̀nà ìtọ́jú ṣáájú.
(1) Ìmúrasílẹ̀ Kí A Tó Ṣáájú Ṣíṣàwárí
1. Ìmúrasílẹ̀ Àpẹẹrẹ: Mu àyẹ̀wò antibody monoclonal 100 mg/ml kí o sì fi omi LAL Reagent pò ó sí 50 mg/ml;
2. Ìmúrasílẹ̀ Reagent: BETMAT KCA Endotoxin Assay Kit (Ìlànà Kinetic Chromogenic) 300 Tests/kit, nọ́mbà katalogi KCA300TB. Ohun èlò náà ní nínú rẹ̀: Chromogenic LAL Reagent, Reconstitution Buffer, Control Standard Endotoxin, LAL Reagent Water;
3. Ìpèsè Ohun Èlò: ① Kinetic Incubating Microplate Reader ELx808IUBET, nọ́mbà àkójọ: 808IUBET; ② Àwọn ọ̀pọ́ dídì gilasi tí kò ní Endotoxin; ③ Àwọn olùpèsè pẹ̀lú àwọn ìtọ́kasí tí kò ní endotoxin; ④ Àwọn àwo microplates 96 tí kò ní Endotoxin; ⑤ Adàpọ̀ Vortex; ⑥ Àgbékalẹ̀ tube ìdánwò.
(2) Awọn Igbesẹ Wiwa
Igbaradi ti Iwọn boṣewa
1. Fi omi LAL Reagent Water po ìwọ̀n endotoxin náà sí oríṣiríṣi ìwọ̀n 0.001, 0.01, 0.1, 1, àti 10 EU/ml;
2. Fi 100 μl ti boṣewa kun si gbogbo kanga ti awo 96-kanga naa, pẹlu awọn kanga mẹta ti o jọra ti a ṣeto fun ifọkansi kọọkan;
3. Fi 100 μl ti LAL Reagent kun si kanga kọọkan;
4. Fi àwo náà sínú Incubating Microplate Reader kí o sì fi sínú iná ní 37°C fún ìṣẹ́jú 120. Wọ́n ìyípadà nínú ìfàmọ́ra ní 405 nm, kí o ka OD405nm ní gbogbo ìṣẹ́jú-àáyá 30, kí o sì kọ́ ìlà ìpele boṣewa (R² ≥ 0.99).
Ṣíṣàwárí Àpẹẹrẹ
1. Fi 100 μl ti ayẹwo antibody monoclonal ti a ti dapọ kun awọn ihò wiwa (awọn kanga meji ti o jọra + awọn kanga iṣakoso ofo meji ti a ṣeto);
2. Tun awọn igbesẹ incubation ati kika ti tito boṣewa ṣe;
3. Ṣírò ìṣọ̀kan endotoxin ti àpẹẹrẹ náà gẹ́gẹ́ bí ìlà tí ó wà ní ìpele, kí o sì sọ ọ́ di púpọ̀ nípa ìṣọ̀kan ìfọ́pọ̀ láti gba ìṣọ̀kan àkọ́kọ́.
Ìfìdíkalẹ̀ ìdènà
1. Oṣuwọn imularada ti ẹgbẹ ti a ti fi sipo (ayẹwo + 0.1 EU/ml endotoxin) jẹ 85%, eyiti o pade ibeere ti 50%-200%, nitorinaa a pinnu pe ko si idilọwọ kankan.
Ìdájọ́ àti Ìròyìn Àbájáde
1. Ìwọ̀n Ìdájọ́: Tí ìpele endotoxin nínú àyẹ̀wò bá jẹ́ ≤ ààlà (fún àpẹẹrẹ, àwọn èròjà ara monoclonal ≤ 1 EU/mg) àti pé ìjẹ́rìí ìdènà náà bá péye, a ó kà àyẹ̀wò náà sí “tóótun”;
2. Àkóónú Pàtàkì Nínú Ìròyìn náà: Ó yẹ kí a fi “ọ̀nà ìtọ́jú ṣáájú” àti “àbájáde ìfìdíkalẹ̀ ìdènà hàn.”
(I) Awọn Koko Pataki ti Iṣakoso Didara Ile-iwosan (QC)
Iṣakoso Didara Reagent
1. Fún gbogbo àkójọ àwọn reagents tuntun, “ìjẹ́rìísí ìmọ̀lára (ọ̀nà gel-clot)” tàbí “ìjẹ́rìísí ìfàṣẹsí ìpele standard curve (ọ̀nà photometric tàbí ọ̀nà rFC)” ni a gbọ́dọ̀ ṣe: Lo ìlànà náà láti ṣàwárí ìmọ̀lára gidi ti reagents náà, èyí tí ó yẹ kí ó bá ìwé ìtọ́ni náà mu;
2. Tí àpẹẹrẹ náà bá lè ní àwọn ohun tó lè dí i lọ́wọ́ bíi glucan, ó yẹ kí a fìdí “ìmọ̀ pàtó” ti reagent náà múlẹ̀: Fi àwọn ohun tó lè dí i lọ́wọ́ bíi glucan kún un kí o sì jẹ́rìí sí i pé kò sí àṣìṣe kankan.
Iṣakoso Ilana Iṣiṣẹ
1. Ṣètò "Ìṣàkóso Rere (PC)" àti "Ìṣàkóso Negative (NC)":
● PC: Ìwọ̀n Endotoxin (láti rí i dájú pé reagent náà ṣiṣẹ́ dáadáa);
● NC: Omi LAL Reagent (láti rí i dájú pé kò sí àbàwọ́n kankan);
2. Ìyàtọ̀ ìbátan ti àwọn àpẹẹrẹ tí ó jọra yẹ kí ó jẹ́ ≤ 10% (ó le ju ìwọ̀n 15% fún omi oníṣègùn lọ).
Ìṣàtúnṣe Ohun Èlò
● Ó yẹ kí a ṣe àtúnṣe ẹ̀rọ ìkàwé microplate lẹ́ẹ̀kan lọ́dún (gígùn ìgbì àti ìṣedéédé ìfàmọ́ra);
● Ó yẹ kí a ṣe àtúnṣe sí pipette lẹ́ẹ̀kan ní ìdámẹ́rin (àṣìṣe ìkún omi ≤ 5%).
(II) Iṣakoso Ewu Ilana Iṣẹjade
1. Ìṣàkóso Ohun Èlò Aláìní: A gbọ́dọ̀ rí endotoxin ti àwọn ohun èlò aise bíi culture medium, serum, àti cleaning column, pẹ̀lú ààlà ≤ 0.01 EU/ml;
2. Ìṣàkóso Ìlànà: Fi “ìgbésẹ̀ yíyọ endotoxin” kún nínú ìlànà ìwẹ̀nùmọ́ (fún àpẹẹrẹ, chromatography ìyípadà anion, endotoxin adsorption affinity chromatography);
3. Ìṣàkóso Àyíká: Endotoxin tó wà nínú afẹ́fẹ́ ní agbègbè Grade A (ibi tí a ti ń kún) ti ibi iṣẹ́ ìṣẹ̀dá gbọ́dọ̀ jẹ́ ≤ 0.03 EU/m³, kí a sì máa ṣe àbójútó déédéé.
Iṣoro ti o wọpọ | Okùnfà Gbòǹgbò | Ojutu |
Ìlànà tí kò dára ti ìlà ìtẹ̀sí boṣewa | Àìsí ìdàpọ̀ tó pọ̀ tó nígbà tí a bá ń da omi ìpele endotoxin pọ̀ | Nígbà tí o bá ń da omi ìṣiṣẹ́ endotoxin rú, lo àdàpọ̀ vortex láti dapọ̀ fún ohun tó ju ìṣẹ́jú-àáyá 30 lọ ní ìgbésẹ̀ kọ̀ọ̀kan |
Àìṣe àtúnṣe tó dára ti àwọn àbájáde ìwádìí | Àyẹ̀wò tí kò dọ́gba (ẹja endotoxin tí a fi sínú ojú protein) | Kí a tó rí i, fi àyẹ̀wò náà sínú omi ìwẹ̀ 60°C fún ìṣẹ́jú mẹ́wàá kí o sì da àdàpọ̀ vortex (yẹra fún ìgbóná gíga tí ó ba endotoxin jẹ́) |
Oṣuwọn imularada kere ju 50% | Àìlè mú ìdènà kúrò | Tún fi omi pò àyẹ̀wò náà kí o sì lo ohun èlò ìfàmọ́ra chromogenic tó lágbára, tàbí kí o lo ọ̀nà ìtọ́jú ṣáájú kí o tó so ìfọ́pọ̀ àti gbígbóná àyẹ̀wò pọ̀ mọ́ra. |
Ṣíṣe Àtúnṣe Iṣẹ́ Àkànṣe àti Àwọn Ìṣẹ̀lẹ̀ Ọjọ́ Ìwájú
- Ìṣọ̀kan Ọ̀nà
So "ọna kinetic chromogenic fun abojuto ninu ilana iṣelọpọ" pọ pẹlu "ọna jeli-clot fun wiwa itusilẹ ọja ikẹhin" lati ṣe iwọntunwọnsi ṣiṣe ati ibamu;
- Gbígbàgbọ́ àwọn ọ̀nà tí a kò rí gbà láti ọ̀dọ̀ ẹranko
2. Gba ọna rFC lati rọpo ọna LAL ibile, ni ibamu pẹlu aabo ẹranko ati awọn ibeere idagbasoke alagbero.
Nípasẹ̀ ìṣètò onípele mẹ́ta ti "ìbáramu ọ̀nà - ìyọkúrò ìdènà - ìṣàkóso dídára tí ó muna", ojutu yii ṣe pàtàkì láti kojú àwọn ibi ìrora pàtàkì ti wíwá endotoxin nínú àwọn oògùn biopharmaceuticals, ó sì le bá àwọn àìní wíwá mu jákèjádò gbogbo ìgbésí ayé láti ìwádìí àti ìdàgbàsókè, ìṣẹ̀dá sí ìforúkọsílẹ̀, ó sì ń pèsè ìdánilójú dídára pàtàkì fún ààbò àwọn oògùn biopharmaceuticals.